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人咽鱗癌細胞

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品牌其他品牌供貨周期一周
應用領域醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業

人咽鱗癌細胞

1、收到FaDu人咽鱗癌細胞后,請按照以下方法進行操作

取出25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態,然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。

 

2、細胞傳代:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3)棄上清,沉淀細胞用12ml*培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,*后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)待細胞*貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

3、細胞凍存:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。 

4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至含5ml*培養基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;

3)棄上清,沉淀用5ml*培養基重懸,接種25cm2培養瓶,于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

 

4)第二天,換用新鮮*培養基繼續培養。

 本公司細胞引種來源:ATCC、DSMZ、ECACC、武大細胞庫、上海生化細胞所、中國科學院典型培養物保藏委員會等

 

人咽鱗癌細胞細胞處理方法:

一、貼壁細胞

1、 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張)。

2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。

3、嚴格遵循無菌操作規范,打開細胞培養瓶。

4、37度平衡1-2小時。

5、用移液管吸取培養基,到50ml離心管中,剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代,如沒有達到添加6ml新鮮培養基繼續培養。

6、如果肉眼檢查上清有細胞,對50ml上清進行離心收集細胞,如果細胞連片狀態,棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化(1ml胰酶37度),接種培養。

 

二、懸浮細胞

1、接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張)。

2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。

3、嚴格遵循無菌操作規范,打開細胞培養瓶。

4、細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。

5、1000rpm,5min 離心,用吸管小心吸出上清,加入培養基,重懸細胞。

6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養瓶種,加入新鮮培養基,置于 37℃,5%CO2 培養(大部分細胞)。

 

培養操作:細胞培養操作指南

細胞常見問題分析:細胞培養常見問題分析

 

細胞在發貨前進行質檢:

1、細胞存種的活性檢測

2、細菌、真菌、霉菌污染物鏡檢

3、衣原體、支原體檢測(熒光法、培養法等)

 

產品質量保證及售后:

1、 細胞為三代以內,活體。運輸過程中細胞出現污染和狀態不好,我們*免費重新發貨。

2、 實驗過程中若確定是客戶問題,客戶僅需支付物流和耗材費用,我們可重新發貨。其他根據情況靈活處理。

3、 產品使用過程中,可提供技術上的指導。

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