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人宮頸內膜腺癌細胞

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詳細介紹
品牌其他品牌供貨周期一周
應用領域醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業

人宮頸內膜腺癌細胞傳代說明:

1.用75%酒精(jing)噴灑整個培養(yang)瓶(ping)消毒,將(jiang)其(qi)平躺置于(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)1-3小時的緩沖,.然后置于(yu)無菌操作臺,打開(kai)瓶(ping)口,將(jiang)其(qi)中(zhong)的培養(yang)液去掉(diao),再往其(qi)中(zhong)加入5-6mL新鮮培養(yang)基(ji)(ji)(以T25培養(yang)瓶(ping)為例)并(bing)置于(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang),根(gen)據細(xi)胞(bao)生長狀況及(ji)培養(yang)基(ji)(ji)顏色變化對(dui)其(qi)進行(xing)換液以及(ji)傳(chuan)代,一般2到3天(tian)換一次液;

2.待細胞長滿(man)瓶(ping)底面積80%-90%,需(xu)要對(dui)其進(jin)行傳(chuan)代,傳(chuan)代比例為1:3到1:8;

3傳(chuan)代(dai)步(bu)驟:將(jiang)0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化(hua)液(ye)(ye)置(zhi)于(yu)37°預熱(re)(re),倒(dao)掉培養(yang)瓶(ping)(ping)(ping)中(zhong)的培養(yang)基,往培養(yang)瓶(ping)(ping)(ping)中(zhong)加入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌(di)后棄去。往瓶(ping)(ping)(ping)中(zhong)加1-2 ml預熱(re)(re)好(hao)的胰酶,置(zhi)于(yu)37°孵(fu)育(yu)消化(hua)(次消化(hua)需時(shi)(shi)常(chang)取出置(zhi)于(yu)顯微鏡(jing)下觀察,以顯微鏡(jing)下細(xi)胞(bao)(bao)(bao)觸角回收(shou)變圓、輕(qing)拍瓶(ping)(ping)(ping)壁(bi)見細(xi)胞(bao)(bao)(bao)脫(tuo)落為*消化(hua)時(shi)(shi)間,記錄*消化(hua)時(shi)(shi)間,以便于(yu)下次消化(hua)),消化(hua)好(hao)后加入3ml*培養(yang)基終止消化(hua)。用移(yi)液(ye)(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)(ping)(ping)壁(bi)上(shang)的細(xi)胞(bao)(bao)(bao),使之*脫(tuo)落,然后收(shou)集細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液(ye)(ye),1200rpm離心3min,棄上(shang)清,加入*培養(yang)基重懸細(xi)胞(bao)(bao)(bao),進行傳(chuan)代(dai)。

保存說明:

凍存條件:80%*培養(yang)基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議(yi)使用本公司的冷凍(dong)液(H-W-100),用4度保存的冷凍(dong)液直接(jie)重懸(xuan)細胞,不能(neng)預熱后使用。)

保存(cun)條件:液(ye)氮存(cun)儲

人宮頸內膜腺癌細胞常見問題(ti)說明(ming):

1.培養瓶(ping)有(you)(you)破裂,培養液有(you)(you)漏液:細胞(bao)極大可能會污染,所以我們會及(ji)時安(an)排幫老(lao)師解決。

2.收到細胞后盡快(kuai)更換為含 10%血清(qing)的新鮮培養基,如因特殊(shu)情況需要(yao)繼(ji)續(xu)使(shi)用(yong)原瓶(ping)培養基,請在原瓶(ping)培養基中額外添加 10%的血清(qing)(原瓶(ping)培養基的繼(ji)續(xu)使(shi)用(yong)時間(jian)zui長不宜超(chao)過 72 小時)

3.細胞(bao)漂浮(fu):培(pei)養(yang)瓶不開封(feng),瓶口(kou)酒(jiu)精擦拭后平躺放(fang)置在培(pei)養(yang)箱。1-2小(xiao)時后觀(guan)察(cha),如(ru)細胞(bao)大部分又貼回(hui)瓶底,表明細胞(bao)活力正(zheng)常,剩(sheng)余漂浮(fu)的細胞(bao)可(ke)以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)觀(guan)察(cha),細胞(bao)生長至匯合度80%,進(jin)行消化傳代;如(ru)細胞(bao)還是不貼壁,將細胞(bao)離心收(shou)集轉到新培(pei)養(yang)瓶,原培(pei)養(yang)瓶加部分培(pei)養(yang)液繼續培(pei)養(yang),中間注意觀(guan)察(cha),我們(men)的技術(shu)人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

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