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人肺腺癌細胞

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人肺腺癌細胞1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發現培養液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高)

其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來美國以后發現這里更*,超凈臺內根本就不點酒精燈。

2. 不要頻繁看細胞。SPC-A-1人肺腺癌細胞對于初學者而言,養細胞就像養孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環境。你跑去看細胞,培養瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經常可以看到新手一天到晚都在看細胞,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。

3. 不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。"    詳見細胞說明書

    傳代方法:    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件:    詳見細胞說明書

    主要文獻:    請具體查閱相關發表文章

細胞培養相關培養基選購基本指南:
如何選擇培養基:經常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養基呢?其實這個問題的答案可以很簡單,也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫,那很簡單,問供應商就行了。或者找到相關的文獻,作為參考。
培養基這么多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養基是公開配方的,或者是專門針對某一種細胞的,如昆蟲基本培養基和神經祖細胞基礎培養基, 但是大部分液體培養基都是專li配方的,也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應商推薦,然后用自己的細胞做幾次傳代培養來選出*合適的培養基。畢竟實踐出真知。
怎么樣才可以買到好的培養基產品:*先,當然需要找對品牌,其次是找對自己所在區域的品牌代理商,針對自己所養的細胞,供應商該選用哪種的培養基進行培養,這樣就可以買到好的而且適合自己的培養基產品。
關于培養基品牌,目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養產品,也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產品。

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