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人肝膽管癌細胞

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人肝膽管癌細胞

細胞培養實驗常見問題總結:
1.一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制。
2.快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?
我們采用快遞發貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞。
3.可否使用與原先培養條件不同之培養基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基,若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。
4.可否使用與原先培養條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 
5.培養基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減。
6. 何時須更換培養基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換。
7.RBE人肝膽管癌細胞系購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集。
8.購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
人肝膽管癌細胞

9. 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。

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