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人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株

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人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;

一、 細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的*辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。

二、 鏡下觀察:

未超過80%匯合度時,將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,放入37℃、5%CO2孵箱培養;

超過80%匯合度時,按要求比例消化傳代。

三、消化方法

1、將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。

2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,棄上清,再加1ml消化液消化,顯微鏡下觀察,等細胞*脫離瓶壁分離成單個后,加培養基混勻,離心收集,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培養基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株

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