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小鼠心肌細胞

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品牌其他品牌供貨周期一周
應用領域醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業

1、培養液:1:1 混合的DMEM / F12 培養液,添加終濃度為10%小牛血清(FCS)、100IU/ml 青霉素、100μg/ml 鏈霉素。

 

2、消化液:胰酶(效價為1:250) 0.08%、膠原酶II(活力為150U/mg) 0.05% ,用pH 7.2-7.8 的D-Hanks溶液配制,-20 ℃保存。

 

3、D-Hanks溶液(pH 7.2-7.8):KCl 0.4 g 、KH2PO4 0.06 g 、NaCl 8.00g 、NaHCO3 0.35 g 、Na 2HPO4•7H2O 0.09 g 、酚紅 0.01 g 1L。

小鼠心肌細胞取生后1-4d的乳鼠,用75%乙醇消毒皮膚,再用大頭針固定乳鼠的頭及四肢,剪開胸部皮膚,用75%乙醇消毒皮下組織,更換鑷子及剪刀,開胸取出心臟,將心臟放入盛有D-Hanks溶液的平皿(或青霉素瓶)中,剪去心房,剪開心室,用D-Hanks溶液沖洗三次,去除殘留積血后,將心臟剪成1mm3 大小的碎片,再將心臟碎片轉移至離心管中,加5ml左右消化液,37℃消化5 min,自然沉淀,棄上清,再加5ml左右消化液,37℃消化20min(每隔2min振搖幾下),用吸管吹打1min 后,將未消化*的心臟碎片吸出至另一離心管中,加入2ml冷的培養液終止消化,1000 rpm 5min ,棄上清,沉淀中加入D-Hanks溶液2ml, 1500 rpm 10min ,棄上清,沉淀中加入培養液2ml,用吸管吹打制成細胞懸液。上述未消化*的心臟碎片補加5ml左右消化液后繼續消化,同樣操作,合并細胞懸液后放入培養瓶中m二氧化碳培養箱中(37℃ 5%CO2)培養。小鼠心肌細胞

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