熟妇高潮喷沈阳45熟妇高潮喷_人妻丰满熟妇av无码区乱_黑人人妻AV一区二区三_少妇太爽丰满一区二区

當前位置:網站首頁 > 產品中心 > > 細胞/細菌專區 > H460人大細胞肺癌細胞

人大細胞肺癌細胞

相關文章/ RELATED ARTICLES
詳細介紹
品牌其他品牌貨號CB015
規格供貨周期一周
主要用途科研應用領域醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業

人大細胞肺癌細胞 細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備RPMI-1640培養(yang)基;優(you)質胎牛血清,10%;雙(shuang)抗(kang),1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度(du)(du):37攝氏度(du)(du),培養箱濕度(du)(du)為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清(qing),10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)(xi)胞(bao)(bao):將(jiang)含(han)有1mL細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)的凍存管在37℃水(shui)浴中迅速搖(yao)晃解凍,加(jia)入(ru)(ru)4mL培(pei)養(yang)(yang)基混合均勻。在1000RPM條件下(xia)離心4分鐘,棄去上清液(ye)(ye),補加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)(yang)基后吹勻。然后將(jiang)所(suo)有細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)加(jia)入(ru)(ru)培(pei)養(yang)(yang)瓶中培(pei)養(yang)(yang)過(guo)夜(ye)(或(huo)將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)加(jia)入(ru)(ru)250px皿中,加(jia)入(ru)(ru)約8ml培(pei)養(yang)(yang)基,培(pei)養(yang)(yang)過(guo)夜(ye))。第二(er)天換液(ye)(ye)并檢查細(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)(chuan)代:如果細胞(bao)密度達80%-90%,即可進行傳(chuan)(chuan)代培(pei)養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄(qi)去培養(yang)上(shang)清,用不(bu)含鈣、鎂離子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

2. 加2ml消(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中,置(zhi)于37℃培(pei)養(yang)(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況,若細(xi)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tai),輕敲幾下培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)后加少量培(pei)養(yang)(yang)基終止消(xiao)化(hua)。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條(tiao)件下離心4分鐘(zhong),棄去上(shang)清液(ye)(ye),補加1-2mL培養液(ye)(ye)后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的(de)比例分到新(xin)(xin)的(de)含(han)8ml培養基的(de)新(xin)(xin)皿中(zhong)或者瓶中(zhong)。

注(zhu):第1次傳代推(tui)薦(jian)傳代比例(li)為1:2,以后傳代比例(li)可根據客戶需(xu)要(yao)自己決定。

3)細(xi)(xi)胞(bao)凍存:待細(xi)(xi)胞(bao)生長狀態良好時,可進(jin)行細(xi)(xi)胞(bao)凍存。

下面T25瓶為類;

1,細胞凍存(cun)時,棄去(qu)培養基后,PBS清(qing)洗(xi)一遍后加(jia)入(ru)1ml胰酶,細胞變圓脫(tuo)落(luo)后,加(jia)入(ru)1ml含血清(qing)的培養基終止(zhi)消化,可使(shi)用血球計(ji)數板計(ji)數。

2,4min 1000rpm 離心去掉上(shang)清。加1ml血清重懸細胞,根(gen)據細胞數(shu)量加入血清和DMSO,輕(qing)輕(qing)混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密(mi)度不低于1x106/ml,每支(zhi)凍存管(guan)凍存1ml細胞懸液,注意凍存管(guan)做好標識(shi)。

3,將凍存管(guan)置(zhi)(zhi)于程序降溫(wen)盒中(zhong),放入(ru)-80度冰(bing)箱,至少(shao)2個小(xiao)時以(yi)后轉(zhuan)入(ru)液氮灌儲存。記錄(lu)凍存管(guan)位置(zhi)(zhi)以(yi)便下次拿取。

  • 人大細胞肺癌細胞 注意事項:

    1.收到細胞(bao)后,若發現干(gan)冰已揮發干(gan)凈、凍存管瓶蓋(gai)脫落、破損(sun)及(ji)細胞(bao)有(you)污染(ran),請立即與我(wo)們聯(lian)系。

    2.收到細(xi)胞先(xian)不開瓶蓋(gai),瓶身擦拭酒(jiu)精后放在(zai)培養箱靜置(zhi)(zhi)2-4小時(shi)(視(shi)細(xi)胞密度(du)而(er)定)穩定細(xi)胞狀態(tai)。接著(zhu)在(zai)倒置(zhi)(zhi)顯微(wei)(wei)鏡下觀(guan)(guan)察(cha)(cha)細(xi)胞生(sheng)長情況(kuang),并(bing)對(dui)細(xi)胞進(jin)(jin)行不同倍數拍(pai)照(zhao)(建議收細(xi)胞時(shi)就(jiu)整(zheng)體外觀(guan)(guan)拍(pai)一(yi)張照(zhao)片(pian),觀(guan)(guan)察(cha)(cha)培養基的顏色和是(shi)否有漏液情況(kuang),隨后在(zai)顯微(wei)(wei)鏡下拍(pai)下細(xi)胞狀態(tai),100*,200*各一(yi)張),觀(guan)(guan)察(cha)(cha)記(ji)錄細(xi)胞在(zai)運輸過程(cheng)中(zhong)是(shi)否有污染情況(kuang)。作為我方進(jin)(jin)行銷售依(yi)據。

    3.由于(yu)細胞(bao)狀(zhuang)態受環境、操作和運輸等(deng)多方面因素影響,故本(ben)公(gong)司只(zhi)保證(zheng)客戶收到細胞(bao)后一周內的(de)細胞(bao)狀(zhuang)態,故客戶需(xu)要(yao)售后時需(xu)出示收到細胞(bao)的(de)時間(jian)證(zheng)明及客戶提供收貨(huo)時間(jian)和發現問(wen)題后客服人(ren)員溝通的(de)時間(jian)證(zheng)明,期間(jian)間(jian)隔時間(jian)不能(neng)大于(yu)7天。

    4.所(suo)有(you)動物細胞均視為有(you)潛在的(de)生物危害(hai)性,必須在二級生物安全臺內操(cao)作,并請注意防護,所(suo)有(you)廢液(ye)及(ji)接觸過此細胞的(de)器(qi)皿(min)需要(yao)滅菌后方能丟棄。

    產(chan)品咨詢

    留言框

    • 產品:

    • 您的單位:

    • 您的姓名:

    • 聯系電話:

    • 常用郵箱:

    • 省份:

    • 詳細地址:

    • 補充說明:

    • 驗證碼:

      請(qing)輸入計(ji)算結果(填(tian)寫阿拉伯數字),如:三加四=7
    Contact Us
    • 聯系QQ:185271790
    • 聯系郵箱:cbzzh188188@qq.com
    • 聯系電話:18818844207
    • 聯系地址:廣州市白云區鶴正街1號中海聯8立方創意園A1棟304室

    掃一掃  微信(xin)咨詢(xun)

    © 2024 廣州市超博(bo)科(ke)技有(you)限公司 版(ban)權所(suo)有(you)  備案號:

    技術支持:        GoogleSitemap

    服務熱線
    020-86438890

    微信服務號