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人尤因肉瘤細胞

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詳細介紹
品牌其他品牌貨號CB006
規格供貨周期一周
主要用途科研應用領域醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業

人尤因肉瘤細胞

1.用75%酒精(jing)噴灑整個(ge)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)消(xiao)毒(du),將(jiang)其(qi)平躺置(zhi)于培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)1-3小時(shi)的緩沖(chong),.然后(hou)置(zhi)于無菌(jun)操作臺,打開(kai)瓶(ping)口(kou),將(jiang)其(qi)中(zhong)的培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)去掉,再往其(qi)中(zhong)加(jia)入5-6mL新鮮培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(以T25培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)為例)并置(zhi)于細胞培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)(yang)(yang),根據細胞生(sheng)長狀況及(ji)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基顏色(se)變化對其(qi)進行(xing)換液(ye)以及(ji)傳(chuan)代,一(yi)般2到3天換一(yi)次液(ye);

2.待細(xi)胞長滿瓶(ping)底面積(ji)80%-90%,需(xu)要(yao)對其進行傳代,傳代比例為1:3到(dao)1:8;

3傳代步驟:將0.25%胰酶(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)液(ye)置于37°預熱,倒掉培(pei)(pei)養瓶中(zhong)(zhong)的培(pei)(pei)養基,往(wang)培(pei)(pei)養瓶中(zhong)(zhong)加(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后棄(qi)去。往(wang)瓶中(zhong)(zhong)加(jia)1-2 ml預熱好的胰酶(mei),置于37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(次消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)需(xu)時常取出置于顯(xian)微鏡下(xia)觀察,以顯(xian)微鏡下(xia)細胞(bao)觸角回收變圓(yuan)、輕(qing)拍瓶壁見細胞(bao)脫落為*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間,記(ji)錄*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間,以便(bian)于下(xia)次消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)好后加(jia)入3ml*培(pei)(pei)養基終止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)。用移液(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹(chui)打瓶壁上的細胞(bao),使(shi)之*脫落,然(ran)后收集細胞(bao)懸液(ye),1200rpm離(li)心(xin)3min,棄(qi)上清,加(jia)入*培(pei)(pei)養基重懸細胞(bao),進行傳代。

人尤因肉瘤細胞保存說明:

凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議使(shi)(shi)用(yong)(yong)本公司的(de)冷凍液(ye)(H-W-100),用(yong)(yong)4度保(bao)存的(de)冷凍液(ye)直接重懸細胞,不(bu)能預熱后使(shi)(shi)用(yong)(yong)。)

保存(cun)條件:液(ye)氮存(cun)儲(chu)

常(chang)見問題(ti)說(shuo)明:

1.培(pei)養瓶有(you)破(po)裂,培(pei)養液有(you)漏液:細(xi)胞極大可能(neng)會污染,所以我們會及時安排幫(bang)老師(shi)解決。

2.收到細胞后盡快更換(huan)為含(han) 10%血(xue)清的新鮮培(pei)養(yang)基(ji),如因特殊情況需要繼續(xu)使用(yong)原瓶(ping)培(pei)養(yang)基(ji),請在原瓶(ping)培(pei)養(yang)基(ji)中額外添加 10%的血(xue)清(原瓶(ping)培(pei)養(yang)基(ji)的繼續(xu)使用(yong)時(shi)間zui長(chang)不宜超過 72 小(xiao)時(shi))

3.細胞(bao)漂(piao)浮(fu):培養(yang)瓶不(bu)開封,瓶口酒精擦(ca)拭后(hou)平躺放置(zhi)在培養(yang)箱。1-2小時(shi)后(hou)觀察,如(ru)細胞(bao)大部分又貼(tie)回瓶底,表明細胞(bao)活力正(zheng)常,剩(sheng)余漂(piao)浮(fu)的細胞(bao)可(ke)以去掉(diao),留8-10ml培養(yang)液(ye)培養(yang)觀察,細胞(bao)生長至匯(hui)合度(du)80%,進行消化傳代;如(ru)細胞(bao)還是不(bu)貼(tie)壁,將細胞(bao)離心收集轉到(dao)新培養(yang)瓶,原培養(yang)瓶加部分培養(yang)液(ye)繼續培養(yang),中(zhong)間注意(yi)觀察,我們的技術人員會一直(zhi)跟蹤指導,直(zhi)到(dao)問(wen)題解決(jue)。

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