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Gibco DMEM/F12斜口原裝培養基

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詳細介紹
品牌其他品牌貨號H4522
規格500ml供貨周期現貨
主要用途細胞培養應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,石油

Gibco DMEM/F12斜口原裝培養基

適合用于常規細胞原代細胞以及干細胞的培養
內毒素含量極低 <3EU/ml(規定:特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ,適合各種細胞培養
七次無菌過濾,zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細菌、真菌、支原體、病(bing)毒及病(bing)毒抗體檢測,符合動物協會要求

Gibco DMEM/F12斜口原裝培養基

如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?

將血清(qing)從冷凍箱(xiang)(xiang)取出(chu)后(hou),先置于2~8℃冰箱(xiang)(xiang)使(shi)之融解(jie),然后(hou)在室溫下(xia)使(shi)之全融。但必須(xu)注意的是,融解(jie)過程中必須(xu)規則地搖(yao)晃均勻(yun)。

長時間(jian)儲存(cun)在2-8℃時,血(xue)(xue)清中的各種蛋白和脂蛋白(如(ru)冷(leng)凝(ning)集素、纖維蛋白原、玻粘(zhan)連蛋白等)可能聚集而形成(cheng)沉淀或可見的混濁。因(yin)此,推薦在-20℃以下儲存(cun)血(xue)(xue)清,并(bing)避免反復(fu)凍融。

我們建(jian)議血清應(ying)保存在-2O℃。若存放(fang)(fang)于4℃時,請勿超過(guo)一(yi)個月。若一(yi)次無(wu)法(fa)用(yong)完一(yi)瓶,建(jian)議無(wu)菌分裝血清至(zhi)恰當的滅菌容器內,再放(fang)(fang)回(hui)冷凍。

2、血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?

沉(chen)(chen)淀包含纖維蛋(dan)白和脂蛋(dan)白。這是正常(chang)特性,不會影響產品(pin)性質。要(yao)除(chu)去沉(chen)(chen)淀,離心(xin)血(xue)清(400g,1-2分(fen)鐘)或者簡(jian)單的(de)讓其沉(chen)(chen)淀在瓶子底部,將血(xue)清小心(xin)的(de)轉移(yi)到另一個無菌瓶里(一般不建議采用(yong)過濾(lv)(lv)的(de)方法除(chu)去沉(chen)(chen)淀,因為(wei)沉(chen)(chen)淀會堵塞濾(lv)(lv)膜而無法過濾(lv)(lv))。大(da)多(duo)情況輕(qing)輕(qing)搖動(dong)沉(chen)(chen)淀并加(jia)熱至37℃就會再(zai)溶解。所以,使用(yong)產品(pin)時(shi)要(yao)搖動(dong)并加(jia)熱血(xue)清至37℃,沉(chen)(chen)淀會自然消失。

 如何避免血清中產生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的產生:

(1)解凍血(xue)清時,請隨時將之(zhi)搖晃均勻,使(shi)溫度及成分均一(yi),減少沉淀的發(fa)生。

(2) 血清(qing)分(fen)裝凍存(cun)時(shi),須規則搖晃(huang)均勻(小心勿(wu)造成氣(qi)泡(pao)),使溫度與(yu)成分(fen)均一(yi)。

(3) 勿(wu)直(zhi)接由-20℃直(zhi)接至(zhi)37℃解凍,因溫(wen)度改變(bian)太大,容易造成蛋白質凝結而發生(sheng)沉淀。

(4) 勿將血(xue)(xue)清置于(yu)37℃太(tai)久(jiu),否(fou)則(ze)血(xue)(xue)清會變得渾濁,同時(shi)血(xue)(xue)清中許多較(jiao)不穩(wen)定的成(cheng)份(fen)也會因此受到破壞,從而影響血(xue)(xue)清的品質。

(5) 血清(qing)的(de)熱滅活非(fei)常容易造成沉淀物(wu)的(de)增多,若非(fei)必要,可(ke)以無須做此步驟。

(6) 若(ruo)必須(xu)做(zuo)血清的熱滅活,請(qing)遵(zun)守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shi)搖晃(huang)均勻。溫(wen)度過高,時(shi)間過久或搖晃(huang)不均勻,都(dou)會(hui)造成沉淀(dian)物的增多。

 培養基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?

一(yi)旦您在(zai)新鮮培養基(ji)中(zhong)添加了(le)血清和抗(kang)生(sheng)(sheng)素時,您應該(gai)在(zai)兩到三周內(nei)使用(yong)它。因為一(yi)些抗(kang)生(sheng)(sheng)素和血清中(zhong)的(de)基(ji)本成分在(zai)解凍后(hou)就開始降解。

 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅(mie)(mie)活(huo)補體系統。激(ji)活(huo)的補體參與溶解細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)事件,刺激(ji)平滑肌收縮,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和血小(xiao)板釋放組胺,激(ji)活(huo)淋巴(ba)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)。在免(mian)疫學 研究,培(pei)養ES細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、平滑肌細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)時,推(tui)薦使用熱滅(mie)(mie)活(huo)血清(qing)。

 有必要做熱滅活嗎?

實(shi)驗顯示,經(jing)過(guo)(guo)正(zheng)確處理(li)的(de)(de)熱(re)滅活血(xue)清(qing)(qing),對(dui)大多數(shu)的(de)(de)細胞而(er)言是(shi)不需要(yao)的(de)(de)。經(jing)此(ci)處理(li)過(guo)(guo)的(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)對(dui)細胞的(de)(de)生(sheng)長只有(you)微(wei)小(xiao)的(de)(de)促進(jin),或*沒(mei)有(you)任何作用(yong),甚至通(tong)常因為(wei)高溫處理(li)影響了血(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)質量,而(er)造成細胞生(sheng)長速率(lv)的(de)(de)降低。而(er)經(jing)過(guo)(guo)熱(re)處理(li)的(de)(de)血(xue)清(qing)(qing),沉淀物的(de)(de)形成會顯著的(de)(de)增(zeng)多,這些(xie)沉淀物在倒置顯微(wei)鏡下觀察,像是(shi)“小(xiao)黑點”,常常會讓(rang)研(yan)究者誤以為(wei)是(shi)血(xue)清(qing)(qing)遭受污染,而(er)把血(xue)清(qing)(qing)放在37℃環境中,又會使此(ci)沉淀物更增(zeng)多,使研(yan)究者誤認為(wei)是(shi)微(wei)生(sheng)物 的(de)(de)分裂擴(kuo)增(zeng)。

若(ruo)非必須,可以不需要做(zuo)熱處理這一步。不但(dan)節省時間,更確保血清的質量(liang)!

舜冉(ran)生物,用誠(cheng)信服務科(ke)研!!!

細胞培養 中出現黑點是污染嗎?如何處理?

一旦您在(zai)細胞(bao)培養(yang)(yang)的過(guo)程中發現有(you)黑點生(sheng)成,首先,要(yao)肉(rou)眼觀(guan)察培養(yang)(yang)基是否混濁,然后,在(zai)鏡(jing)下觀(guan)察培養(yang)(yang)細胞(bao)生(sheng)長的狀態(tai),黑點是否游動。如果細胞(bao)被污(wu)染(ran),微生(sheng)物(wu)則會大量繁殖,培養(yang)(yang)基就會迅速(su)變黃(huang)、變混濁。污(wu)染(ran)包括細菌污(wu)染(ran)、支原體污(wu)染(ran)等。

如果在鏡下觀察細(xi)胞(bao),生長(chang)狀(zhuang)態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關(guan):

(1)細(xi)胞(bao)(bao)生長過老,破碎的細(xi)胞(bao)(bao)殘骸(hai);

(2)血清質(zhi)量不好,反復(fu)凍融(rong)的結(jie)果;

(3)配(pei)制培養基的pH值偏(pian)高(gao),不宜細胞生長;

(4)配制培養基的(de)水質(zhi)、容器不合格(ge)。可應(ying)用離心、過濾(lv)的(de)方法去除這些(xie)黑點;

(5)培養原代細胞中出現小黑點,可(ke)(ke)能是原代組(zu)織中的雜質,多(duo)次傳代可(ke)(ke)以消除。

 細胞培養中如何防止黑點生成?

(1) 盡可能地(di)減少血(xue)清凍融次(ci)數。

(2) 培養基(ji)無需37℃水浴(yu)。

(3) 培養基保持(chi)PH值(zhi)7.0- 7.2。

(4) 嚴格控制配制培養基的水質,容器定(ding)期刷洗(xi)。

(5) 掌握細(xi)胞(bao)傳代的時機,細(xi)胞(bao)切勿生長過(guo)老。

小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?

來源(yuan)不同(tong):胎(tai)牛血(xue)(xue)清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在(zai)屠宰懷(huai)孕母牛的(de)時候,通過心臟穿(chuan)刺采血(xue)(xue)獲取的(de)胎(tai)牛的(de)血(xue)(xue)清,新生牛(小牛)血(xue)(xue)清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的(de)小牛。

組份與比例不(bu)同:兩者所含的(de)促細(xi)胞生(sheng)長(chang)因子(zi)、促貼(tie)附(fu)因子(zi)、激素及其(qi)他活性(xing)物(wu)質等組份與比例不(bu)同,用(yong)途與用(yong)法不(bu)同:某些細(xi)胞必需(xu)胎牛血清才能生(sheng)長(chang),而有些細(xi)胞只需(xu)小牛血清即可,使用(yong)濃度(du)不(bu)同,一般在5%-10%,有特殊要求的(de)濃度(du)在20%。

血(xue)(xue)(xue)清(qing)保存(cun)(cun)和使(shi)用須注意(yi):血(xue)(xue)(xue)清(qing)應(ying)保存(cun)(cun)在(zai)-5℃至(zhi)-20℃,若存(cun)(cun)放在(zai)4℃不可超過(guo)一個月(yue)。解(jie)凍(dong)血(xue)(xue)(xue)清(qing)時 ,應(ying)先將血(xue)(xue)(xue)清(qing)至(zhi)于2-8℃冰箱,并(bing)經常搖(yao)勻(yun)使(shi)之溶(rong)解(jie),然(ran)后至(zhi)室溫(wen)放置使(shi)之升(sheng)溫(wen)。不可將冷凍(dong)的血(xue)(xue)(xue)清(qing)直接放入37℃水浴或者溫(wen)箱中,如放在(zai)37℃解(jie)凍(dong),顏色加深(shen),粘稠度也(ye)會增加,血(xue)(xue)(xue)清(qing)在(zai)解(jie)凍(dong)和熱滅活后,應(ying)按(an)用量(liang)分裝(zhuang)并(bing)于-20℃保存(cun)(cun),避免反復凍(dong)融(rong)。

舜冉(ran)生物,用誠信服務科研!!!

適合用于常規細胞原代細胞的培養
內毒素含量極低 <3EU/ml(規定:特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ,適合各種細胞培養
七次無菌過濾,zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細(xi)菌、真菌、支(zhi)原體、病(bing)毒及病(bing)毒抗體檢測(ce),符合(he)動物(wu)協會(hui)要求

血(xue)(xue)清(qing)是(shi)(shi)由血(xue)(xue)漿去除纖(xian)維蛋白而(er)形成(cheng)(cheng)的一(yi)種很復雜的混合(he)物,其(qi)組成(cheng)(cheng)成(cheng)(cheng)份雖(sui)大部分(fen)已知,但還有(you)(you)一(yi)部分(fen)尚不(bu)清(qing)楚,且血(xue)(xue)清(qing)組成(cheng)(cheng)及含量(liang)常隨(sui)供血(xue)(xue)動物的性別(bie)、年(nian)齡(ling)、生(sheng)理條件和營(ying)養條件不(bu)同而(er)異。血(xue)(xue)清(qing)中含有(you)(you)各種血(xue)(xue)漿蛋白、多肽、脂(zhi)肪(fang)、碳水化合(he)物、生(sheng)長(chang)因子(zi)、激素、無機物等(deng),這(zhe)些物質對促進細胞(bao)生(sheng)長(chang)或抑制生(sheng)長(chang)活性是(shi)(shi)達到(dao)生(sheng)理平(ping)衡(heng)的

牛血清是細胞(bao)培(pei)養(yang)中用量zui大(da)的(de)天然培(pei)養(yang)基,含(han)有豐富的(de)細胞(bao)生長必須的(de)營養(yang)成份(fen),常用于動物細胞(bao)的(de)體外培(pei)養(yang),具有極(ji)為重(zhong)要的(de)功能。

1.提供對維持(chi)細胞指數生長(chang)的激素,基礎培(pei)養基中沒有或(huo)量很少的營養物,以及主要的低分(fen)子(zi)營養物。

2. 提(ti)供(gong)結合蛋白,能(neng)識別維(wei)生素(su)、脂(zhi)類(lei)、金屬和其他激素(su)等,能(neng)結合或調變它們所結合的物(wu)質(zhi)活力(li)。

3.有(you)(you)些情況(kuang)下結合蛋白(bai)質能與有(you)(you)毒金(jin)屬和(he)熱原質結合,起到解毒作用。

4.是細(xi)胞(bao)貼壁、鋪展在(zai)塑料培養基質(zhi)上所需因子來源。

5.起酸堿(jian)度緩沖液作用。

6.提供蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制(zhi)劑,使在細(xi)(xi)胞傳代時使剩余胰蛋(dan)白(bai)酶失活,保護(hu)細(xi)(xi)胞不受傷害(hai)。

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