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GIBCO DMEM/f12_gibco培養基

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詳細介紹
品牌其他品牌貨號H4522
規格500ml供貨周期現貨
主要用途細胞培養應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,石油

GIBCO DMEM/f12_gibco培養基

適合用于常規細胞原代細胞以及干細胞的培養
內毒素含量極低 <3EU/ml(規定:特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ,適合各種細胞培養
七次無菌過濾,zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細菌(jun)、真(zhen)菌(jun)、支原體(ti)、病(bing)毒及病(bing)毒抗體(ti)檢(jian)測,符合動物協會要求

GIBCO DMEM/f12_gibco培養基

 如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?

將血清從冷(leng)凍箱取(qu)出后(hou),先置于2~8℃冰箱使(shi)之(zhi)(zhi)融解,然后(hou)在室溫下使(shi)之(zhi)(zhi)全融。但必須(xu)注(zhu)意的(de)是,融解過(guo)程中(zhong)必須(xu)規則地搖(yao)晃均勻。

長時間儲存(cun)在2-8℃時,血清(qing)中的各種(zhong)蛋(dan)(dan)白和脂蛋(dan)(dan)白(如(ru)冷凝(ning)集(ji)素(su)、纖維蛋(dan)(dan)白原、玻粘連蛋(dan)(dan)白等)可能聚集(ji)而(er)形成沉淀或(huo)可見的混濁(zhuo)。因此,推薦在-20℃以下儲存(cun)血清(qing),并(bing)避免反復凍融。

我們建議血清(qing)應保(bao)存(cun)在-2O℃。若存(cun)放(fang)于4℃時(shi),請勿超(chao)過一(yi)個(ge)月。若一(yi)次無法用完一(yi)瓶,建議無菌(jun)(jun)分(fen)裝(zhuang)血清(qing)至恰(qia)當的滅菌(jun)(jun)容(rong)器內(nei),再(zai)放(fang)回冷(leng)凍。

2、血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?

沉(chen)淀(dian)包含纖(xian)維蛋(dan)(dan)白(bai)和脂蛋(dan)(dan)白(bai)。這(zhe)是正常(chang)特性,不會影響產(chan)品性質(zhi)。要除(chu)去沉(chen)淀(dian),離心(xin)(xin)血清(qing)(400g,1-2分(fen)鐘)或者(zhe)簡單的(de)(de)讓其(qi)沉(chen)淀(dian)在瓶(ping)子底部(bu),將血清(qing)小心(xin)(xin)的(de)(de)轉移到(dao)另一個無菌瓶(ping)里(li)(一般不建議采用過濾的(de)(de)方法(fa)除(chu)去沉(chen)淀(dian),因為沉(chen)淀(dian)會堵塞濾膜(mo)而無法(fa)過濾)。大多情(qing)況輕(qing)輕(qing)搖動(dong)沉(chen)淀(dian)并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chan)品時要搖動(dong)并加熱血清(qing)至37℃,沉(chen)淀(dian)會自然消失。

 如何避免血清中產生沉淀?

按如下操作可避(bi)免沉淀(dian)的產生:

(1)解凍血清時,請隨時將(jiang)之(zhi)搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少(shao)沉淀的(de)發(fa)生(sheng)。

(2) 血清分裝凍存(cun)時,須規則搖晃均勻(yun)(小心勿造成(cheng)氣泡),使溫度與(yu)成(cheng)分均一(yi)。

(3) 勿直接(jie)由-20℃直接(jie)至37℃解凍,因溫度(du)改變太(tai)大,容易造成蛋白質(zhi)凝結而發生沉淀(dian)。

(4) 勿將血清(qing)(qing)置于37℃太久,否則血清(qing)(qing)會變得渾濁,同時(shi)血清(qing)(qing)中(zhong)許多較不(bu)穩(wen)定的成(cheng)份也會因此受到破壞,從而(er)影響血清(qing)(qing)的品質。

(5) 血清的熱(re)滅活非(fei)常容易(yi)造成沉淀物(wu)的增多,若(ruo)非(fei)必(bi)要,可以無(wu)須做(zuo)此步驟(zou)。

(6) 若必須做血清的熱滅活(huo),請遵守56℃,30分(fen)鐘的原則,并且隨(sui)時搖(yao)晃均勻。溫(wen)度過(guo)高,時間過(guo)久(jiu)或搖(yao)晃不均勻,都會造(zao)成沉淀物(wu)的增(zeng)多(duo)。

 培養基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?

一(yi)旦(dan)您在(zai)新(xin)鮮培養基中添(tian)加了血清和(he)抗生素時,您應該在(zai)兩到三周(zhou)內使用它。因為(wei)一(yi)些抗生素和(he)血清中的基本(ben)成(cheng)分在(zai)解凍后(hou)就(jiu)開始降(jiang)解。

 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活(huo)(huo)補體系統。激活(huo)(huo)的補體參與溶解細(xi)(xi)胞(bao)事件,刺(ci)激平滑肌收縮,細(xi)(xi)胞(bao)和血小板釋放組胺,激活(huo)(huo)淋巴細(xi)(xi)胞(bao)和巨噬細(xi)(xi)胞(bao)。在免疫學 研究,培養ES細(xi)(xi)胞(bao)、平滑肌細(xi)(xi)胞(bao)時,推薦使用熱滅活(huo)(huo)血清。

 有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示(shi),經(jing)(jing)過(guo)正(zheng)確處(chu)(chu)理(li)的(de)熱滅活血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing),對大多數(shu)的(de)細胞(bao)而(er)(er)言是不(bu)需要的(de)。經(jing)(jing)此處(chu)(chu)理(li)過(guo)的(de)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)對細胞(bao)的(de)生(sheng)長(chang)只有微(wei)小(xiao)的(de)促進(jin),或*沒有任何作用,甚至通常(chang)因為(wei)(wei)高溫(wen)處(chu)(chu)理(li)影響(xiang)了血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)的(de)質量,而(er)(er)造成細胞(bao)生(sheng)長(chang)速率的(de)降(jiang)低。而(er)(er)經(jing)(jing)過(guo)熱處(chu)(chu)理(li)的(de)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing),沉淀物(wu)(wu)的(de)形成會(hui)(hui)顯著的(de)增多,這些沉淀物(wu)(wu)在(zai)倒置顯微(wei)鏡下觀察,像是“小(xiao)黑點”,常(chang)常(chang)會(hui)(hui)讓研(yan)究者誤以為(wei)(wei)是血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)遭受污(wu)染,而(er)(er)把血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)放在(zai)37℃環境中,又會(hui)(hui)使(shi)此沉淀物(wu)(wu)更(geng)增多,使(shi)研(yan)究者誤認(ren)為(wei)(wei)是微(wei)生(sheng)物(wu)(wu) 的(de)分(fen)裂擴增。

若非必須,可以不需(xu)要(yao)做熱(re)處理這(zhe)一步(bu)。不但節省時間,更確保(bao)血清的質量!

舜(shun)冉生物,用(yong)誠信服務(wu)科(ke)研!!!

細胞培養 中出現黑點是污染嗎?如何處理?

一旦您在細胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)的過程中發現有黑點(dian)生(sheng)成,首先,要肉眼觀察培(pei)養(yang)基是否混濁,然后,在鏡下(xia)觀察培(pei)養(yang)細胞(bao)(bao)生(sheng)長的狀(zhuang)態,黑點(dian)是否游動。如(ru)果(guo)細胞(bao)(bao)被污(wu)染(ran),微生(sheng)物(wu)則(ze)會大量繁殖(zhi),培(pei)養(yang)基就會迅速(su)變黃、變混濁。污(wu)染(ran)包(bao)括細菌(jun)污(wu)染(ran)、支(zhi)原體污(wu)染(ran)等。

如果(guo)在(zai)鏡下觀察細胞,生長狀態良好(hao),與黑點出現(xian)前(qian)相比,沒有任何(he)變化,那么,黑點的(de)出現(xian)可能與以下幾種情況有關:

(1)細胞生長過老,破(po)碎的細胞殘骸(hai);

(2)血清質量不好,反復凍(dong)融(rong)的結果;

(3)配制培(pei)養基的(de)pH值(zhi)偏高,不(bu)宜細胞生長;

(4)配(pei)制培養(yang)基(ji)的(de)水質、容器不合格。可應用離心、過濾的(de)方(fang)法去除這些黑點;

(5)培養原代細胞中出(chu)現(xian)小(xiao)黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。

 細胞培養中如何防止黑點生成?

(1) 盡可能(neng)地減少血(xue)清(qing)凍融(rong)次數。

(2) 培養(yang)基無(wu)需37℃水(shui)浴(yu)。

(3) 培養(yang)基(ji)保持PH值7.0- 7.2。

(4) 嚴格控制配制培(pei)養基的水質,容器定(ding)期刷洗。

(5) 掌握細胞傳(chuan)代的時機,細胞切(qie)勿生長過老。

小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?

來源不同:胎牛(niu)血(xue)清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母(mu)牛(niu)的(de)時(shi)候,通過心(xin)臟穿(chuan)刺采血(xue)獲(huo)取的(de)胎牛(niu)的(de)血(xue)清,新生牛(niu)(小牛(niu))血(xue)清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的(de)小牛(niu)。

組份與(yu)比例不同:兩者(zhe)所含的(de)促細(xi)胞(bao)生長因子(zi)、促貼附因子(zi)、激(ji)素及其他活性物質等組份與(yu)比例不同,用(yong)途與(yu)用(yong)法不同:某些細(xi)胞(bao)必需(xu)胎牛血(xue)清(qing)才(cai)能生長,而有些細(xi)胞(bao)只需(xu)小牛血(xue)清(qing)即可,使用(yong)濃(nong)(nong)度(du)不同,一般在(zai)5%-10%,有特(te)殊要求的(de)濃(nong)(nong)度(du)在(zai)20%。

血(xue)(xue)清(qing)(qing)保(bao)存(cun)和(he)使(shi)(shi)用須注意:血(xue)(xue)清(qing)(qing)應保(bao)存(cun)在(zai)-5℃至-20℃,若存(cun)放(fang)(fang)在(zai)4℃不可超過一個月。解凍(dong)(dong)血(xue)(xue)清(qing)(qing)時 ,應先將血(xue)(xue)清(qing)(qing)至于(yu)(yu)2-8℃冰箱(xiang),并(bing)經常搖勻使(shi)(shi)之溶解,然后至室溫放(fang)(fang)置使(shi)(shi)之升(sheng)溫。不可將冷凍(dong)(dong)的(de)血(xue)(xue)清(qing)(qing)直(zhi)接放(fang)(fang)入37℃水浴或者溫箱(xiang)中,如(ru)放(fang)(fang)在(zai)37℃解凍(dong)(dong),顏色加(jia)深,粘稠度也會增(zeng)加(jia),血(xue)(xue)清(qing)(qing)在(zai)解凍(dong)(dong)和(he)熱滅活后,應按用量(liang)分裝并(bing)于(yu)(yu)-20℃保(bao)存(cun),避免(mian)反復(fu)凍(dong)(dong)融。

舜冉生物,用誠(cheng)信服務(wu)科研!!!

適合用于常規細胞原代細胞的培養
內毒素含量極低 <3EU/ml(規定:特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ,適合各種細胞培養
七次無菌過濾,zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細(xi)菌、真菌、支原體、病(bing)毒(du)及病(bing)毒(du)抗(kang)體檢測,符合動物協(xie)會要(yao)求

血(xue)(xue)清是由血(xue)(xue)漿(jiang)去除纖維(wei)蛋白而形成(cheng)(cheng)的(de)一種很(hen)復雜(za)的(de)混合物(wu),其組成(cheng)(cheng)成(cheng)(cheng)份雖(sui)大部分(fen)已知,但還有一部分(fen)尚不清楚(chu),且(qie)血(xue)(xue)清組成(cheng)(cheng)及含(han)量常隨(sui)供(gong)血(xue)(xue)動(dong)物(wu)的(de)性別、年齡、生(sheng)理條(tiao)件和(he)營養條(tiao)件不同而異。血(xue)(xue)清中含(han)有各(ge)種血(xue)(xue)漿(jiang)蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物(wu)、生(sheng)長因子、激素(su)、無機物(wu)等,這些物(wu)質(zhi)對促(cu)進(jin)細胞生(sheng)長或抑制生(sheng)長活(huo)性是達(da)到生(sheng)理平衡的(de)

牛血清是(shi)細胞(bao)(bao)培養中(zhong)用(yong)量zui大的天然培養基,含(han)有豐富(fu)的細胞(bao)(bao)生(sheng)長必(bi)須的營養成份,常用(yong)于動物細胞(bao)(bao)的體外(wai)培養,具有極為(wei)重要的功能。

1.提供對維持(chi)細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

2. 提供(gong)結合(he)蛋白,能(neng)識(shi)別維生素(su)、脂類(lei)、金(jin)屬和其他激素(su)等,能(neng)結合(he)或調變它們所結合(he)的物質(zhi)活力。

3.有些情況下結(jie)合蛋白質能與有毒(du)金屬和熱原質結(jie)合,起到解毒(du)作(zuo)用(yong)。

4.是細胞貼壁、鋪展在(zai)塑料培養基(ji)質上所(suo)需因子來源。

5.起酸堿(jian)度(du)緩沖液作用。

6.提供(gong)蛋(dan)白酶抑制劑,使在細胞(bao)傳代時使剩余胰蛋(dan)白酶失活,保護細胞(bao)不受(shou)傷害。

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