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Hyclonesv30087.02北美特級血清*

詳細介紹
品牌其他品牌貨號Sv30087.02
規格500ml供貨周期現貨
主要用途細胞培養應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,石油

Hyclonesv30087.02北美特級血清*?


適合用于常規細胞原代細胞以及干細胞的培養
內毒素含量極低 <3EU/ml(規定:特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ,適合各種細胞培養
七次無菌過濾,zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協會要求

Hyclonesv30087.02北美特級血清*?

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的

胎牛血清FBS保存方法
1、需要長期保存的PAN牛血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在 37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血 清中的有效成分會被破壞,而影響血清質量。如果一次無法用完一瓶,可 將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留 一 定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。

2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接 過濾血清。

3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全 部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程 中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度 與成分均一,減少沈淀的發生。.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而 出現沉淀。

4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體 成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉 淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補體 參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞 發生化學趨化和活化。

5、血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身 的質量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下 "小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物 的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑 點不會影響細胞生 長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。

 

胎牛血清使用中遇到的常見問題總結
 

一、血清滅活問題。

 

1、問:加到培養基中的血清必須滅活嗎?

 

答:不是必須的,看做什么實驗了。

 

2、問:胎牛血清滅活是56℃ 30分鐘嗎?

 

答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。 但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是 需要滅活,一般是56℃,30min。

 

3、問:我要做滋養細胞培養,胎牛血清要滅活嗎?

 

答:進口的一般都已滅活,國產的不一定,還是滅活一下再用較安全。

 

4、問:我用病毒上清轉染細胞,培養用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影 響轉染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合,影響 轉染,正確嗎?細胞是單核細胞白血病細胞, 病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養基加病毒孵育幾小時,目的是什么?

 

答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主 結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據細胞的狀態決定。血清不一定需 要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活 !這要根據實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。

 

5、問:(1)我買的是PAN南美胎牛血清,要滅活嗎?有些說法是需要,有些說直接解凍后就可以加入到培 養基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關系嗎?

 

答:關于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數實驗室將血清的熱滅活還是作為 常規來執行,因為有兩個作用,是滅活補體,第二是滅活血清中可 能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處 理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響。

 

我在實驗室處理血清的時候,有一次水浴箱在滅活過程中出現故障,溫度升高到80℃,血清變成了凝膠狀 ,我重新處理了另外一份血清,將兩份血清對比,發現高溫直接影響到 血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時以 上,肯定也會對里面的蛋白起到破壞作用。下次有機會我做個延長滅活時間的實驗試試,看看到底有多大的影響。熱 滅活之后,血清放在四 度冰箱久了,就會有沉淀產生,這常常會被認為是微生物污染或者是黑膠蟲污染。為了驗證到 底有沒有污染,常常又會把血清放置37℃溫育,但是血清中的蛋白會進一步析出,后還是 要做鏡檢,無菌培養試驗 ,和革蘭氏染色試驗,非常麻煩。

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