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簡要分析無外泌體胎牛血清的主要用途

更新(xin)時間:2022-02-19瀏覽:838次

  無外泌體胎牛血清適用外泌體研究,無支原體,無內毒素。胎牛血清是大多數細胞培養重要的生長支持物。天然來源的FBS會含有大量的外泌體等囊泡成分。由于FBS來源的外泌體會對研究結果產生巨大干擾,因此,外泌體研究時必須使用去除外泌體后的FBS進行細胞培養。
 
  對于大多數細胞來說,體外培養時所用的標準培養基都必須在基礎培養基的基礎上外加FBS作為生長添加物。常用的FBS通常來至牛血清,其中含有大量的牛外泌體。這些外泌體含牛的相關蛋白質或miRNA等分子,當研究相關細胞自身分泌外泌體時,牛血清中的外泌體可能會造成嚴重的背景問題,從而影響或干擾結果的判斷。
 
  無外泌體胎牛血清的主要用途:
 
  無外泌體胎牛血清可用于犬MSC來源外泌體的分離:用10%無外泌體胎牛血清、1%雙抗、1%L-谷氨酰胺和88%DMEM基礎培養基配制培養基,以制得的培養基傳代培養MSC,取第3-5代收集上清在4℃,300g離心10min除細胞;收集上清后在4℃,16500g離心20min除去細胞碎片;收集上清后用0.22um的濾膜過濾;收集上清后在4℃,120000g超高速離心90min;去上清后,用生理鹽水重懸沉淀,再次以4℃,120000g超高速離心90min;去上清后,用生理鹽水重懸沉淀,收集懸液即為犬MSC外泌體制劑。

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