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一文讀懂:gibco澳洲胎牛血清的使用方法和保存方法

更新時間:2018-12-02瀏覽:1010次

   gibco澳洲胎牛血清的使用方法:

  在細胞培養過程中,經常加入的胎牛血清,常使用gibco澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果,我們在實驗中使用10%的gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的GibcoFBS或者20%的gibco澳洲胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的gibco澳洲胎牛血清濃度。
  gibco澳洲胎牛血清的保存方法:
  1、需要長期保存的gibco澳洲胎牛血清必須儲存于低溫冰箱中。冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在高溫放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質量。如果一次無法用完一瓶,可將分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。
  2、一般廠商提供的gibco澳洲胎牛血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
  3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
  4、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。
  5、gibco澳洲胎牛血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量。可用離心,5分鐘去除,也可不用處理。顯微鏡下“小黑點”:經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點”,常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。

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