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技術文章
  • 18 2021-1
    漲知識了,ELISA試劑盒的性能優勢

    一、ELISA試劑盒的性能優勢:1、ELISA試劑盒將特定抗體(一抗)結合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測抗體的抗體,識別待測抗體。2、二抗是一種與酶偶聯的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識別并結合待測抗體。3、測定時,固定的一抗先與樣品稀釋液反應,將樣品中待測抗體固定;洗滌后再與二抗反應。每一步之間都要進行洗滌。4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變為有色產物。5、產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺有無定性...

  • 5 2021-1
    小老鼠實驗呀(!!!)

    灌胃給藥后,為何我的小鼠頻繁死亡?從新藥研發角度來說,因口服給藥是經濟的方式,在研究中。動物實驗中,灌胃是口服給藥的方法,然而,看似簡單的幾步,可對于初學者因為手法不當而傷到氣道或食道,進而引起小鼠死或者逐漸消瘦至死亡。那么在灌胃的實驗中,我們究竟該掌握哪些注射手法和技巧呢?下面1起來看看!灌胃:借助器械(灌胃針)將藥物直接灌入動物胃內;藥物循環途徑:食管→胃→小腸→小腸毛細血管(吸收入血)→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室的吸收進入血...

  • 18 2020-12
    PSC培養:從血清到成分更明確的系統? 不再傻傻分不清

    人胚胎干細胞(ESC)初由干細胞研究JamesThomson等人于1998年獲得,在當時的研究中,他們將ESC培養在有絲分裂滅活的小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)上,并使用添加20%胎牛血清(FBS)及其他成分的培養基[1]。這項開創性的工作成為開發各種多能性干細胞(PSC)培養系統的起點。為了降低異種蛋白和外來物質的污染風險,人們將MEF替換為人源的細胞,包括人成纖維細胞[2–4]。為了進一步減少可變成分和動物性原料,人們將FBS替換為GibcoKnockOut血清替代物(Kn...

  • 16 2020-12
    ST30-3302胎牛血清的概述及優勢

    一、ST30-3302胎牛血清的概述:1、血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。2、血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。二、ST30-3302胎牛血清的優勢:1、牛血清是細胞培養中用量大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必需的營養成份,常用于動物細胞的體外培養...

  • 14 2020-12
    如何高效又穩定的構建干細胞疾病模型?

    為什么多能干細胞大有前途?人類多能干細胞具有自我更新能力并且具有分化成為任何細胞類型的潛力,幫助克服現有動物模型中對某些疾病的限制。雖然動物模型長久以來被用于研究疾病的不同發育階段,但該類模型并不完美,比如,動物模型心臟的尺寸以及靜息心率與人類有很大的差異,在一些情況下某些疾病的表型可能是無法準確呈現。此外,病人來源的人類細胞的培養雖也逐漸被用于科學研究以及醫療發展。但是從病人血液或者組織中分離得到的這些細胞系很難持續的培養,同時特定的細胞系也很難從中分離得到。人類多能干細胞...

  • 10 2020-12
    co-IP實驗

    由于co-IP相對問題較多,以co-IP為例進行介紹。Step1固定抗體Step2加樣Step3結合,去除非特異性蛋白Step4靶蛋白(紅色)洗脫或者互作蛋白復合物(紅色+黃色)洗脫Step5分析檢測—WesternBlot或者質譜常用“黑話”上圖證明了EDR1和EDR4有相互作用。如果想要設計好實驗,讓我們先弄清以下“黑話”的意思吧。陽性對照:證實細胞裂解物中確實存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白對(co-IP,比如誘餌蛋白X和靶蛋白Y),即為常說的input。可直接取抽好的蛋...

  • 9 2020-12
    IP、co-IP、pull-down?

    某個實驗間隙…萌新:開題報告已提交,轉眼1個月過去了,實驗還是一頭霧水,為啥我的co-IP拉不下來蛋白?奮斗中的師兄:我當初正好相反,拉下來的蛋白被抗體條帶覆蓋住了,換個抗體忒不好找,無奈換了個蛋白,還好挺順利。久經沙場的大師兄:蛋白吧,不但種類多,理化性質差異較大,關鍵它們又喜歡組隊在細胞里干活,co-IP又是常用的手段,掌握好這個工具還是很重要的,總不能隨隨便便就換個蛋白。IP、co-IP、pull-down簡介IP(Immunoprecipitation),免疫沉淀:是...

  • 8 2020-12
    CB-如何讓活細胞成像的熒光信號明亮且穩定?

    活細胞熒光成像往往需要更長時間的觀察和拍攝,對熒光信號的持久穩定要求更高。這就需要研究者要選用更明亮更穩定的熒光染料,如Invitrogen™MolecularProbes™熒光標記試劑,同時盡可能優化實驗條件。除此之外,提高活細胞成像的信噪比還可通過使用能減少細胞外背景熒光或增加標記熒光染料光穩定性的試劑進行信號優化。降低背景熒光活細胞成像實驗中非常重要的一點是需要在專門的培養基中進行成像。常規培養基含有酚紅可淬滅可見光波段的熒光染料,或含有自發熒光...

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