熟妇高潮喷沈阳45熟妇高潮喷_人妻丰满熟妇av无码区乱_黑人人妻AV一区二区三_少妇太爽丰满一区二区

當前位置:首頁 > 技術文章 > U937細胞高效率轉染條件分享

U937細胞高效率轉染條件分享

更新時間:2020-08-24瀏覽:990次


U937細胞高效率轉染條件分享


一、轉染材料準備

1. 轉染試劑用量10ul

2. DNA/siRNA濃度:電訊

3. 細胞密度:1*106-1*105

4. 轉染用培養板:6孔板

5. 轉染試劑:zeta life ,Advanced DNA RNA轉染試劑;貨號:AD600025

6. 轉染時間:15小時

7. 細胞培養胎牛血清:Z7181FBS-500胎牛血清

8. 細胞凍存液:L0100無血清細胞凍存液


注意:本細胞轉染用量條件不適合lipo使用。





操作過程:

1.提前1接種細胞細胞匯合度在60-80%左右,再進行轉染。

2. 核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照比例關系直接混合,用移液器吹打、混勻,室溫靜止15分鐘。

3.在細胞培養基加入核酸復合物根據參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養基里面可以含有血清。

4.細胞換液:轉染24小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉染過程中不用換液。

5.分析結果質粒DNA轉染48-72小時后熒光檢測轉染效率,48-96小時檢測mRNA或蛋白表達。若進行穩定表達細胞株的篩選,則在轉染后24-48小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA轉染后9小時熒光檢測轉染效率,48-72小時檢測mRNA或蛋白表達。

 




Contact Us
  • 聯系QQ:185271790
  • 聯系郵箱:cbzzh188188@qq.com
  • 聯系電話:18818844207
  • 聯系地址:廣州市白云區鶴正街1號中海聯8立方創意園A1棟304室

掃一掃  微信咨詢

© 2024 廣州市超博科技有限公司 版權所有  備案號:

技術支持:        GoogleSitemap

服務熱線
020-86438890

微信服務號