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小老鼠實驗呀(!!!)

更新時間:2020-01-05瀏覽:2645次

灌胃給藥后,為何我的小鼠頻繁死亡?

 從新藥研發角度來說,因口服給藥是經濟的方式,在研究中。動物實驗中,灌胃是口服給藥的方法,然而,看似簡單的幾步,可對于初學者因為手法不當而傷到氣道或食道,進而引起小鼠死或者逐漸消瘦至死亡。那么在灌胃的實驗中,我們究竟該掌握哪些注射手法和技巧呢?下面1起來看看!

灌胃: 借助器械(灌胃針)將藥物直接灌入動物胃內;

 藥物循環途徑:食管→胃→小腸→小腸毛細血管(吸收入血)→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室的吸收進入血液循環。

 

灌胃給藥模式圖

 

特點:

  • 安q性高:各種給藥方式中,口服給藥是穩的;

  • 可選的劑型比較多:只要保證藥物是均勻且穩定即可;

  • 給藥體積大:小鼠:0.1-0.8ml(0.2 ml /10g);大鼠:1-3ml。

生物利用度低藥物經胃腸道吸收,并存在胃腸道首過代謝和肝臟首過代謝,生物利用率相對較低,僅為靜脈的25-30%;對于部分化合物吸收不恒定,誤差較大。

灌胃的實驗步驟

 

準備工具

8/9/12號灌胃針頭配套1.0 ml注射器;如下圖為9號灌胃針頭/1.0 ml注射器,為了防止插入時造成損傷,針頭呈倒水滴型。

注射器

 

注:

  • 灌胃針的分類:如下圖為小鼠灌胃常見灌胃針類別,根據尺寸不同有8/9/12號;另外還有直頭和彎頭區別;

  • 灌胃針的選擇:尺寸大小的選擇1般可根據小鼠的年幼決定,如<30g,建議用8、9號;30g以上可選擇12號;其中9號針頭直徑小于常規的大頭,特別適用幼鼠;直頭彎頭可根據個人習慣選擇,初學者建議先適用彎頭練習;

     

  • 灌胃針的獲取:可直接購買,不建議手動處理的注射器針頭,易刺傷小鼠食道;

     

  • 灌胃針的深度:因為動物有個體差異,實驗前可先測量小鼠口腔至胃的距離,進而選擇合適長度的灌胃針,避免插入過深或過淺。小鼠入針1般3-4cm,大鼠一般4-6cm。

 

操作步驟

  • 固定小鼠:用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚,用左手的無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,使其頭、頸和身體在1條直線;若第1次抓取時不得當,1定要放開重抓,以免影響后續操作;

     

  • 進針:右手持注射器(1ml的注射器配灌胃針頭),從1側嘴角進針,輕壓舌根,輕輕向前推,進入食管后會感覺有個刺空感,緩慢推進,1般當針插入小鼠3~4cm,即灌胃針的3/4時即可注射;

     

  • 注意: 若感到阻力或動物掙扎比較厲害時,說明插錯位置,應馬上停止進針或將針拔出;待動物恢復平靜后,再次嘗試。

 

常見問題解答

 

  • 灌胃后,為何小鼠死亡?

主要考慮2種原因,① 因為小鼠的氣管靠近食管,若灌胃針誤入氣管,藥物會進入氣管導致小鼠當場窒息死亡;②刺傷食道:若入針不當,損傷或穿破食管,會導致小鼠逐漸消瘦并死亡。

 

  • 灌胃時為了避免小鼠死亡,應該注意?

要主要正確抓取和插入。抓取時:小鼠體位一定要保持,頭、頸部及身體1條線,盡量保證插入的是食管而不是氣管。插入時:嘴角進針,然后豎直向下,先試探性的稍微用力,慢慢向下,1旦感覺有阻礙就得停止,針無阻力才可注射。

 

  • 大鼠灌胃和小鼠區別主要在于哪里?

大鼠操作步驟與小鼠基本一樣,但因大鼠個體很大,易掙扎,所以難度更大,所以1定要準確抓取;另外灌胃針型號不樣,多用16號,20號適合更大型大鼠,并根據注射藥物的量配套2或5ml的注射器

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