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你知道這些細胞自噬標記的好工具嗎?

更新時間:2019-11-23瀏覽:1235次

       細胞自噬(Autophagy)對細胞正常行使功能至關重要,涉及細胞穩態、發育、細胞死亡、應對侵入等,各種自噬相關研究也一直備受關注。       自噬早提出于20世紀60年代,在2016年,諾貝爾生理學和醫學獎授予了在自噬性溶酶體研究作出貢獻的日本分子細胞生物學家大隅良典(Yoshinori Ohsumi)。在疫情來襲,科學家爭相探尋有效治療藥物時,也有研究者關注細胞自噬和病毒感染的關聯

     超博推薦-賽默飛品牌-可提供一系列關于細胞自噬及其機制研究的工具,包括Invitrogen™ Molecular Probes™ 的p62及LC3B特異標記染料用以研究自噬活性,使研究人員對細胞自噬與泛素降解機制之間的聯系進行深入研究,用于追蹤溶酶體并入自噬體的過程,還可以檢測蛋白質從合成到通過自噬途徑聚集和泛素化的全過程等。

使用LC3B追蹤自噬過程

LC3B可從細胞質基質中獲得,并與早期自噬過程中的吞噬泡形成有關。這種定位信息可作為自噬膜的常用標記,還可監控其發展變化的過程,實現:

? 活細胞及固定細胞中的自噬追蹤及定位

? 對含LC3B的囊泡進行實時pH監控

? 定量分析LC3B的聚積

Premo Autophagy Sensor LC3B-RFP (紅)標記U2OS細胞

 

使用p62追蹤選擇性自噬過程

p62可作為將要被自噬作用降解的小泡的受體,也可作為要被清除的泛素化蛋白聚集物的受體。p62蛋白可結合泛素,也可與LC3結合,從而靶向自噬體并促進泛素化蛋白的清除,可以進行:

? 活細胞中的p62追蹤

? 與細胞標記同時使用進行多色分析

 A549細胞中 p62陽性小泡沿微管分布圖像

 

溶酶體定位和追蹤

溶酶體與隔離細胞膜融合從而形成自噬性溶酶體,可作為在降解前追蹤自噬性溶酶體融合的有效工具,而具有細胞滲透性的LysoTracker染料僅需毫微摩爾級濃度即可標記并在溶酶體內部定位酸性細胞器。

? 對酸性細胞器具有高度選擇性

? 多種熒光顏色可供選擇

? 可與其他熒光染料或蛋白同時使用進行多色分析

 使用LysoTracker Deep Red共定位HeLa細胞

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