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技術 | 還在 2D 細胞培養?Out 了,3D 培 養玩起來!

更新時(shi)間:2018-10-16瀏覽(lan):1427次

                 ;          技術 | 還在 2D 細胞培養(yang)?Out 了,3D 培 養(yang)玩起來! 
                                                               作者:燕子 
你的細胞是養在哪兒呀?......不就是塑料的細胞培養皿中嗎?圓的,方的,長的隨你選俺都 有! 
 
那(nei)你的組(zu)織實(shi)驗和細胞(bao)實(shi)驗結果都能(neng)(neng)一致嗎?嗯(ng)嗯(ng),大(da)部(bu)分還是能(neng)(neng)的,那(nei)另一部(bu)分呢?我(wo)也(ye) 不知(zhi)道嘞!做了好多(duo)遍的!

其(qi)(qi)實(shi)呢,我們在(zai)細(xi)(xi)(xi)胞水平的(de)(de)研究大部分(fen)呢還(huan)是在(zai) 2D 水平的(de)(de),然而細(xi)(xi)(xi)胞在(zai)體內(nei)生(sheng)活的(de)(de)環境(jing)遠 遠復雜的(de)(de)多。3D 細(xi)(xi)(xi)胞培(pei)養相比 2D,優勢就(jiu)很(hen)明顯,更接近細(xi)(xi)(xi)胞的(de)(de)體內(nei)狀態,能夠(gou)提高細(xi)(xi)(xi)胞因(yin) 子(zi)、抗體和(he)其(qi)(qi)他(ta)分(fen)子(zi)的(de)(de)產量,測試(shi)劑盒已經到了 ρg 級細(xi)(xi)(xi)胞因(yin)子(zi)測不到心(xin)酸再也不會有(you)了! 在(zai) 3D 體系(xi)內(nei)干(gan)細(xi)(xi)(xi)胞能夠(gou)有(you)效的(de)(de)分(fen)化,基因(yin)表達(da)、細(xi)(xi)(xi)胞活動與(yu)體內(nei)過程更接近。 

 建立 3D 細胞體系,聽上去很復雜的樣子;現在就用模擬肺環境為例,介紹一下肺部 3D 體 系建立。 
 Immunocompetent 3D Model of Human Upper Airway for Disease Modeling and In Vitro 
Drug Evaluation 
 建立上皮細胞&纖維原細胞共培養體系 
 ES 支架切割成 2cm2 每小塊,放置距離紫外光源 8cm 處滅菌 15min,每一面都需要這樣操作
滅菌哦。切割好的支架移入 12 孔板中(無菌操作),將一個鋼圈放置在支架上,加抗生素再 進一步滅菌,放入恒溫孵箱過夜。吸去抗生素,用 PBS 清洗,后加細胞培養液浸沒支架。在 支架支撐物里上皮細胞支架放在纖維原單層細胞支架上形成 2D 共培養模型。 

 

圖:鋼(gang)圈(quan)圈(quan)定細(xi)(xi)胞接(jie)種的面積(ji);支架支撐物放在(zai) 2D 氣-液界面(白色圓柱)里,支架在(zai)類 似肺(fei)組織(zhi)在(zai)適當的條件(ECM)下培(pei)養(yang)(yang)(上(shang)(shang)皮細(xi)(xi)胞在(zai)上(shang)(shang)層和(he)成纖維細(xi)(xi)胞浸沒(mei)),模仿(fang)體外肺(fei) 組織(zhi)環境。以防在(zai)培(pei)養(yang)(yang)過程中(zhong)下撥分(fen)離或移動,支架固定在(zai)*的支撐物上(shang)(shang)。細(xi)(xi)胞在(zai)培(pei)養(yang)(yang) 基(目標(biao)細(xi)(xi)胞所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)(yang)基)中(zhong)孵育。 

 

                                      建立上皮&樹突&纖維原細(xi)胞(bao) 3D 共培養 


 

上皮細胞&纖維原細胞共培養體系在孵箱中孵育 14 天后插入樹突細胞支架,培養基仍為混 合培養基。上皮&樹突&纖維細胞 3D 體系培養 14 天,使其形成更似生理環境的細胞間聯系。 
 
接下來你想研究肺部(bu)哪(na)個(ge)病,哪(na)個(ge)藥,哪(na)種細胞就放進去相互作用(yong)吧! 

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