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技術 | 還在 2D 細胞培養?Out 了,3D 培 養玩起來!

更新時間:2018-10-16瀏覽:1395次

                           技術 | 還在 2D 細胞培養?Out 了,3D 培 養玩起來! 
                                                               作者:燕子 
你的細胞是養在哪兒呀?......不就是塑料的細胞培養皿中嗎?圓的,方的,長的隨你選俺都 有! 
 
那你的組織實驗和細胞實驗結果都能一致嗎?嗯嗯,大部分還是能的,那另一部分呢?我也 不知道嘞!做了好多遍的!

其實呢,我們在細胞水平的研究大部分呢還是在 2D 水平的,然而細胞在體內生活的環境遠 遠復雜的多。3D 細胞培養相比 2D,優勢就很明顯,更接近細胞的體內狀態,能夠提高細胞因 子、抗體和其他分子的產量,測試劑盒已經到了 ρg 級細胞因子測不到心酸再也不會有了! 在 3D 體系內干細胞能夠有效的分化,基因表達、細胞活動與體內過程更接近。 

 建立 3D 細胞體系,聽上去很復雜的樣子;現在就用模擬肺環境為例,介紹一下肺部 3D 體 系建立。 
 Immunocompetent 3D Model of Human Upper Airway for Disease Modeling and In Vitro 
Drug Evaluation 
 建立上皮細胞&纖維原細胞共培養體系 
 ES 支架切割成 2cm2 每小塊,放置距離紫外光源 8cm 處滅菌 15min,每一面都需要這樣操作
滅菌哦。切割好的支架移入 12 孔板中(無菌操作),將一個鋼圈放置在支架上,加抗生素再 進一步滅菌,放入恒溫孵箱過夜。吸去抗生素,用 PBS 清洗,后加細胞培養液浸沒支架。在 支架支撐物里上皮細胞支架放在纖維原單層細胞支架上形成 2D 共培養模型。 

 

圖:鋼圈圈定細胞接種的面積;支架支撐物放在 2D 氣-液界面(白色圓柱)里,支架在類 似肺組織在適當的條件(ECM)下培養(上皮細胞在上層和成纖維細胞浸沒),模仿體外肺 組織環境。以防在培養過程中下撥分離或移動,支架固定在*的支撐物上。細胞在培養 基(目標細胞所用培養基)中孵育。 

 

                                      建立上皮&樹突&纖維原細胞 3D 共培養 


 

上皮細胞&纖維原細胞共培養體系在孵箱中孵育 14 天后插入樹突細胞支架,培養基仍為混 合培養基。上皮&樹突&纖維細胞 3D 體系培養 14 天,使其形成更似生理環境的細胞間聯系。 
 
接下來你想研究肺部哪個病,哪個藥,哪種細胞就放進去相互作用吧! 

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